标题：Mitotic Chromosomes in Live Cells Characterized Using High-Speed and Label-Free Optical Diffraction Tomography
译名：采用高速和无标记的光学衍射层析成像分析活细胞中有丝分裂染色体的特点
作者：Tae-Keun Kim等
时间：2019-11-8
期刊：Cells
影响因子：5.54
摘要：细胞核是一个三维的，动态的细胞器组织亚核室，如染色质和核仁。这些区域的结构和功能是通过扩散和相关因素之间的相互作用以及动态和结构变化来维持的。最近使用荧光显微技术的研究表明，蛋白质因子可以进入异染色质和有丝分裂染色体，并自由移动，尽管它们密集的结构。然而，染色体在细胞分裂期间的物理化学性质还没有完全了解。在本研究中，折射率(RI)、有丝分裂染色体的体积等特征特性，采用无标记光学衍射层析成像与互补共焦激光扫描显微镜和荧光相关光谱相结合的方法对染色体内荧光探针的扩散系数(D)进行量化。这些参数的变化与渗透条件有关，表明RI的变化与有丝分裂染色体和胞质扩散系数的变化相一致。活体细胞有丝分裂期间染色体的连续RI层析成像图像与三维共聚焦显微图像进行了比较，证明渗透变化引起的染色体压实和分解的特征是染色体RI、体积和荧光蛋白的流动性的连锁变化。
推荐语:在本研究中，利用共表达H2B-mRFP和单体GFP (mGFP)的DM细胞，对光学衍射层析成象（ODT）、荧光共聚焦3D显微成像和荧光相关光谱学（FCS）进行直接比较。以单体GFP作为荧光探针，量化有丝分裂染色体的扩散系数(D)和局部粘度。利用tomocube，获得了DM细胞有丝分裂染色体的3D-RI图像，并将这些分析与使用共聚焦激光扫描显微术（CLSM）和FCS的分析相结合，与HeLa细胞相比，具有少量大型染色体的DM细胞的层析折射率（RI）图像染色单体的结构更清晰。
